近年来，过继性T细胞 (ATC) 疗法将自体或同种异体T细胞注入癌症患者体内，已显示出相当大的前景。Southam 等人首先证明了这种疗法的可行性。1966 年，半数晚期癌症患者在与患者来源的白细胞和自体肿瘤细胞进行联合移植后显示肿瘤消退。白血病的同种异体造血干细胞移植代表了临床上部署的第一个有效的过继转移方法，并且临床改善被证明是由 T 细胞移植物对抗肿瘤反应介导的。

具有肿瘤浸润淋巴细胞的 ATC

1980年代后期，美国国家癌症研究所率先使用肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)进行ATC疗法来治疗转移性黑色素瘤。从癌症活检中分离出的淋巴细胞用IL-2大大扩增，然后用大量IL-2重新静脉注射到同一患者体内。客观反应率为34%；然而，反应的中位持续时间仅为4个月，很少有患者出现完全反应。后来在93名转移性黑色素瘤患者中纳入ATC治疗前淋巴去除的研究更为成功，20名（22%）患者的肿瘤完全消退，其中19名患者在治疗3年后仍处于完全缓解状态。

高通量技术使新抗原特异性TIL的筛选和富集成为可能，最近在转移性乳腺癌患者中显示出前景。此外，敲低编码细胞因子诱导型含SH2蛋白(Cish) 的基因（TCR信号传导的负调节因子）可增强小鼠模型中ATC治疗的抗肿瘤反应。然而，为了让基于TIL的 ATC疗法引发持久反应（图 5），具有抗肿瘤活性的效应T细胞必须存在于肿瘤中，而许多癌症类型并非如此。其他调整T细胞活性和增殖的创新方法可能允许开发更多的治疗方法。

图 5：过继性 T 细胞疗法。肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) 从患者肿瘤活检组织中分离出来，并用 IL-2 体外扩增。然后将 TIL 注入到经历了淋巴耗竭的患者体内，为转移的 TIL 提供一个利基，使其扩大、充当效应细胞并产生免疫记忆。由于 T 细胞来源于肿瘤，因此假设大部分 T 细胞可以识别肿瘤相关抗原 (TAA) 或新抗原。

用于 ATC 的工程淋巴细胞

与体外扩增肿瘤特异性 T 细胞相关的挑战导致了TCR工程淋巴细胞的发展（图 5）。然而，这些细胞仅限于对MHC呈递的肿瘤抗原（在人类中也称为人类白细胞抗原(HLA)而不是对肿瘤细胞上的表面抗原作出反应。然而，合成嵌合抗原受体(CAR)可以绕过 MHC限制并将特异性细胞毒性直接作用于恶性细胞表面的靶分子。从患者（或同种异体供体）分离的T细胞经过基因改造以表达CAR，然后扩增并注入患者体内。这克服了肿瘤细胞经常下调MHC分子的问题，这使得细胞无法将抗原呈递给常规T细胞。

CAR包含一个抗原结合域，通常来自抗体的可变区，与TCR的信号域和各种共刺激分子相连（图 5）。鉴于细胞表面信号蛋白的域模块化，可以使用蛋白质工程组装细胞外靶向域和内部信号转导域的混合和匹配。这为针对特定肿瘤定制CAR提供了许多选择。

第一代CAR T细胞仅依靠CD3ζ链来模拟TCR信号传导，但由于T细胞增殖和细胞因子产生有限，这种设计在临床试验中无效。随后几代 CAR T 细胞已被设计为包括来自CD28、CD40配体和其他T细胞活化正调节因子的结构域，以增强体内活化和细胞毒性。一种工程化的单链PD1阻断剂也显示出与仅具有CD28域的第二代CAR T细胞类似的增强功效。尽管 CAR T 细胞通常是使用逆转录病毒转导设计的，但最近的工作使用了CRISPR-Cas9技术。CRISPR-Cas9可用于直接编辑TCR种系序列，这可能导致更均匀的CAR T细胞生成，并最终获得更好的功效。

CAR T细胞疗法发展的一个限制是肿瘤细胞表面需要独特的组织限制性靶抗原。例如，专为所有 B 细胞表达的细胞表面分子CD19设计的CAR T细胞已成功治疗 B 细胞恶性肿瘤。第二代CD19特异性CAR T细胞的首次临床部署导致慢性淋巴细胞白血病的持久反应。CD19 特异性第二代 CAR T 细胞在 B 细胞急性淋巴细胞白血病 (B-ALL) 中的其他临床试验导致所有接受测试的 B-ALL 患者病情缓解。

一项关于参加该临床试验的 B-ALL 患者的随访报告显示，53名患者中有44名（83%）疾病完全缓解，中位随访时间为29个月。据报道，弥漫性大 B 细胞淋巴瘤患者也取得了类似的成功，因此FDA于2017年批准了这些CAR-T细胞疗法用于治疗 B 细胞恶性肿瘤。

CAR T细胞疗法治疗B-ALL和弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床成功部分是由于靶向CD19抗原，这是一个理想的候选者，因为它在某些B细胞恶性肿瘤中高表达，并且对B 细胞谱系。正常CD19+ B细胞的交叉靶向不会妨碍治疗或引起严重的副作用。然而，即使作为理想的靶点，CD19抗原丢失也是治疗失败的常见原因。

CD22是B-ALL中恶性细胞通常表达的另一种抗原，并在I期试验中显示出作为CAR T 细胞治疗靶点的前景。目前正在研究其他靶点，尤其是肿瘤新抗原，用于不表达CD19的血液系统恶性肿瘤以及实体瘤。基于有希望的临床前和临床数据，B 细胞成熟抗原 (BCMA)靶向 CAR T 细胞疗法在2021年获得 FDA批准用于多发性骨髓瘤。然而，由于报告的患者复发，对其他靶抗原的研究仍在继续。

最近的一项临床前研究确定了另一种靶抗原 GPRC5D，其疗效和毒性与BCMA靶向CAR T细胞疗法相当。迄今为止，CAR T细胞疗法仅在实体瘤上取得了一定的成功并且改进疗法的创新方法正在进行中。

最近确定的泛癌靶点B7-H3（也称为CD276）已在多个儿科实体瘤模型中取得成功。除了直接充当细胞溶解剂外，CAR T细胞还可以针对恶劣的肿瘤微环境并恢复耗尽的T细胞。例如，新一代“装甲”CAR T细胞经过改造可产生IL-12，可以克服肿瘤环境中 Treg细胞和骨髓细胞的免疫抑制，促进CD8+ T细胞的细胞溶解活性并增强骨髓细胞募集和抗原呈递。

CAR T细胞的功效也可以通过嵌合细胞因子受体 (4αβ)的共表达来增强，该受体刺激响应IL-4的增殖，IL-4是一种通常在肿瘤微环境中丰富的细胞因子。初步研究表明，这种方法适用于针对不同肿瘤相关抗原(TAA)的CAR T细胞，并且正在进行头颈癌的临床试验。此外，转录因子JUN的过表达显示出对CAR T细胞耗竭的抵抗力。

总体而言，CAR T细胞已成功治疗B细胞恶性肿瘤，继续研究这种针对难治性癌症的新治疗方式将是令人兴奋的。

ATC 的局限性和不利影响

CART细胞疗法可能会产生毒性，并影响许多不同的器官系统，严重程度不一。患者最常经历细胞因子释放综合征(CRS)和神经毒性。CRS源于体内CAR T细胞的强大激活和增殖，通常在细胞转移后迅速出现。症状通常是轻微的和流感样的，但也可能是严重的和危及生命的，包括低血压、高烧、毛细血管渗漏、凝血病和多系统器官衰竭。也可能发生严重的神经系统事件，例如CAR T细胞相关脑病综合征，通常以意识模糊和谵妄为特征，但有时也与癫痫发作和脑水肿有关。糖皮质激素是轻度CRS和CAR T细胞相关脑病综合征的一线治疗药物。

Tocilizumab是一种人源化抗IL-6抗体，是治疗由CART细胞疗法引起的CRS的高效二线治疗药物[201]。CD19 特异性CAR T细胞疗法的其他副作用包括淋巴细胞减少症和低丙种球蛋白血症，可以通过静脉注射免疫球蛋白疗法进行有效控制，类似于原发性B细胞免疫缺陷患者接受的治疗。这些副作用背后的机制尚不清楚，进一步的研究可能会产生避免或最小化毒性的方法。最近开发的一种新型CRS小鼠模型表明，它不是由CAR T细胞衍生的IL-6介导，而是由分泌 IL-6、IL-1 和一氧化氮的受体巨噬细胞介导。因此，IL-1阻断代表了针对CRS204的军备中可能的新干预。

此外，一项对低亲和力CD19特异性 CAR T 细胞的临床研究表明毒性降低并增强了功效。降低毒性的其他努力包括设计具有多种受体特异性的CAR T细胞并通过使用基于mRNA的方法来减少细胞毒性的半衰期，这些方法允许瞬时受体表达或包括可以被外源性试剂激活以进行克隆的自杀盒删除注入的细胞。

ATC方法需要针对特定患者的治疗设计，其成本可能过高，患者获得治疗的机会有限且制造具有挑战性。在美国，CAR T细胞疗法tisagenlecleucel和 axicabtagene ciloleucel 的直接成本分别为每位患者475,000美元和 373,000美元。然而，这些值并未考虑与治疗CAR T细胞疗法常见的严重不良反应相关的额外成本，估计这会使药物相关成本增加 30,000美元或更多209。与CAR T细胞疗法相比，检查点封锁的价格约为每月12,500美元。患者获得CAR T细胞疗法也代表了一个主要问题，因为只有少数实验室经过认证可以产生CAR T细胞，并且只有少数专业的三级医疗中心能够实施这种疗法。最后，CAR T 细胞制造的可变性和缺乏标准实践可能导致不同的结果。

专注于 T 细胞的癌症免疫疗法已成为对抗癌症的强大工具。经过多年的基础科学发现和随后的临床转化，才明确证明了调节免疫系统治疗癌症的能力。k8凯发(中国)所讲述的癌症免疫治疗成功案例凸显了基础科学研究与临床实践之间的内在联系。它们还说明了建立在坚实的基础科学基础上的从工作台到床边的方法如何能够成功地对抗人类最可怕的疾病之一。